Glosario

60 términos usados en química de péptidos, análisis y regulación.

503A

Sección 503A de la Ley Federal de Alimentos, Medicamentos y Cosméticos de EE. UU., que regula la preparación magistral por farmacéuticos o médicos con licencia para pacientes individuales a partir de recetas. Las sustancias a granel deben cumplir criterios específicos, como figurar en la lista de sustancias a granel 503A de la FDA.

503B

Sección 503B de la Ley Federal de Alimentos, Medicamentos y Cosméticos de EE. UU., que regula las instalaciones de subcontratación registradas que elaboran preparaciones magistrales conforme a las buenas prácticas de fabricación vigentes y bajo inspección de la FDA, con sus propias listas de sustancias a granel.

A

Acetato

Anión del ácido acético, un contraión alternativo común al trifluoroacetato para péptidos destinados a trabajo biológico. Las sales de acetato suelen obtenerse mediante un paso de intercambio. Más

Acetilación

Adición de un grupo acetilo, con mayor frecuencia a la amina N-terminal. La acetilación N-terminal elimina una carga positiva y puede reducir la escisión por aminopeptidasas. Más

Agonista

Molécula que se une a un receptor y lo activa, produciendo una respuesta. Los agonistas parciales producen menos que la respuesta máxima, y los antagonistas se unen sin activarlo.

Agregación

Autoasociación de moléculas peptídicas en oligómeros, geles o fibrillas. Se ve favorecida por la hidrofobicidad, la concentración alta, un pH cercano al punto isoeléctrico y los ciclos de congelación-descongelación. Más

Alícuota

Porción medida de una solución madre que se separa para un solo uso. Dividir en alícuotas evita los ciclos repetidos de congelación-descongelación y la contaminación de toda la solución madre. Más

Amidación C-terminal

Sustitución del ácido carboxílico C-terminal por una carboxamida. Elimina una carga negativa, es común en las hormonas peptídicas naturales y modifica la masa esperada en aproximadamente −1 Da respecto del ácido libre. Más

Aminoácido

Molécula orgánica con un grupo amino, un grupo carboxilo y una cadena lateral unidos a un carbono central. Veinte aminoácidos estándar son los componentes básicos de los péptidos y las proteínas. Más

Análogo

Molécula derivada de un péptido original mediante la sustitución, adición o modificación de residuos para cambiar propiedades como la estabilidad o la selectividad por el receptor.

B

BLA

Solicitud de licencia de productos biológicos (Biologics License Application), la presentación que solicita la aprobación de la FDA para comercializar un producto biológico. Algunos péptidos y proteínas de mayor tamaño se regulan como productos biológicos.

C

Carga microbiana

Número de microorganismos viables presentes sobre o dentro de un material antes de la esterilización. Es una medida cuantitativa, distinta de una prueba de esterilidad de tipo aprobado/no aprobado. Más

Categoría 1 / Categoría 2

Categorías que usa la FDA en sus listas provisionales de sustancias a granel propuestas para la preparación magistral. Las sustancias de la Categoría 1 están en evaluación y pueden usarse conforme a la política provisional, mientras que las de la Categoría 2 se han identificado como generadoras de preocupaciones de seguridad significativas; deben consultarse directamente los listados vigentes.

Ciclación

Formación de un anillo dentro de un péptido, uniendo los extremos, enlazando cadenas laterales o conectando una cadena lateral con un extremo. Los péptidos cíclicos suelen estar más restringidos conformacionalmente y ser más resistentes a las proteasas que los lineales.

COA (certificado de análisis)

Documento que informa los resultados de las pruebas de un lote de producción específico; suele abarcar identidad, pureza, contenido y contaminantes, con los métodos y el laboratorio que realizó las pruebas. Más

Coeficiente de extinción

Medida de la intensidad con la que una molécula absorbe luz a una longitud de onda determinada. En los péptidos suele estimarse a 280 nm a partir del contenido de Trp, Tyr y cistina, y se usa para determinar la concentración por absorbancia UV. Más

Colapso de la torta

Pérdida de la estructura porosa de un producto liofilizado, que se contrae en una masa densa o vítrea cuando se calienta por encima de su temperatura de colapso durante el secado o absorbe humedad después. Más

Contenido neto de péptido (NPC)

Porcentaje en peso de un polvo que corresponde al péptido; el resto son contraiones, agua y disolvente residual. Se mide mediante análisis de aminoácidos o análisis de nitrógeno. Más

Contraión

Ion de carga opuesta que equilibra las cargas de un péptido en estado sólido. Los péptidos sintéticos suelen llevar aniones unidos a sus grupos amina y guanidino protonados. Más

D

D-aminoácido

Forma especular de un aminoácido; los péptidos naturales se componen principalmente de L-aminoácidos. Las sustituciones por D-aminoácidos se usan en péptidos sintéticos para reducir la degradación enzimática.

Desamidación

Conversión de la amida de la cadena lateral de una asparagina o glutamina en ácido carboxílico, lo que añade alrededor de 1 Da y una carga negativa. Es más rápida en las secuencias Asn-Gly y a pH neutro a alcalino. Más

E

Endotoxina

Lipopolisacárido de la membrana externa de las bacterias gramnegativas. Es un potente activador de la señalización inmunitaria innata y puede confundir los experimentos celulares y en animales. Más

Enlace peptídico

Enlace amida que une el grupo carboxilo de un aminoácido con el grupo amino del siguiente. Se forma por condensación con pérdida de agua. Más

ESI (ionización por electrospray)

Método de ionización que pulveriza una solución a través de una aguja cargada para producir iones en fase gaseosa, normalmente con múltiples cargas en el caso de los péptidos. Suele acoplarse a la cromatografía líquida. Más

Extremo C-terminal

Extremo de una cadena peptídica que porta un grupo alfa-carboxilo libre, o una forma modificada de este, como una amida. Más

Extremo N-terminal

Extremo de una cadena peptídica que porta un grupo alfa-amino libre. Por convención, las secuencias se escriben comenzando por el extremo N-terminal. Más

F

Factor C recombinante (rFC)

Versión clonada de la enzima detectora de endotoxina del LAL, utilizada con un sustrato fluorogénico como ensayo de endotoxina sin componentes animales que no responde a los beta-glucanos. Más

Fmoc

9-fluorenilmetoxicarbonilo, un grupo protector del grupo alfa-amino lábil en medio básico, utilizado en la estrategia de SPPS más común. Se elimina con piperidina en cada ciclo. Más

Forma salina

Sal específica en la que se aísla un péptido ionizable, definida por su contraión, como una sal de trifluoroacetato, acetato o clorhidrato. La forma salina afecta la composición del polvo y el contenido neto de péptido. Más

Fragmento

Péptido que corresponde a una parte de una secuencia más larga de un péptido o una proteína. TB-500 suele describirse como un péptido basado en un fragmento relacionado con la timosina β4. Más

G

GMP

Buenas prácticas de fabricación, las normas regulatorias de calidad que rigen la producción de medicamentos y sus ingredientes. Los materiales de grado de investigación generalmente no se producen conforme a GMP.

GRAVY

Promedio general de hidropatía (grand average of hydropathy), el valor medio de hidropatía de todos los residuos de una secuencia en la escala de Kyte–Doolittle. Los valores positivos indican una secuencia hidrofóbica en conjunto. Más

H

HPLC

Cromatografía líquida de alta resolución, una técnica que separa los componentes de una mezcla bombeándola a través de una columna empaquetada. Es el método estándar para medir la pureza de los péptidos. Más

I

ISO/IEC 17025

Norma internacional sobre la competencia de los laboratorios de ensayo y calibración. La acreditación conforme a ella indica que los métodos y el sistema de calidad de un laboratorio han sido evaluados de forma independiente. Más

L

LAL (lisado de amebocitos de Limulus)

Reactivo preparado a partir de células sanguíneas del cangrejo herradura que coagula en presencia de endotoxina. Se usa en ensayos de endotoxina de gel-coágulo, turbidimétricos y cromogénicos. Más

LC-MS

Cromatografía líquida acoplada a espectrometría de masas, que separa los componentes y mide la masa de cada uno a medida que eluye. Se usa para identificar el producto principal y las impurezas individuales. Más

Liofilización

Secado por congelación: eliminación del agua de un material congelado por sublimación al vacío. Los péptidos suelen suministrarse liofilizados porque el estado seco ralentiza la degradación. Más

Lipidación

Unión covalente de un ácido graso u otro lípido a un péptido. En la semaglutida y la tirzepatida, una cadena lateral de diácido graso favorece la unión a la albúmina sérica. Más

M

MALDI-TOF

Desorción/ionización láser asistida por matriz con un analizador de tiempo de vuelo. La muestra se cocristaliza con una matriz y se ioniza con un láser, produciendo principalmente iones con una sola carga. Más

Masa monoisotópica

Masa de una molécula calculada usando el isótopo más abundante de cada elemento. Corresponde al primer pico de un patrón isotópico resuelto. Más

Masa promedio

Masa de una molécula calculada a partir de las abundancias isotópicas naturales de cada elemento. En péptidos grandes puede superar a la masa monoisotópica en varios daltons. Más

N

NDA

Solicitud de nuevo fármaco (New Drug Application), la presentación que solicita la aprobación de la FDA para comercializar un nuevo medicamento. La mayoría de los fármacos peptídicos sintéticos se han aprobado mediante NDA.

Número de lote

Identificador asignado a un lote de material producido en las mismas condiciones. Vincula un envase con su certificado de análisis y con los registros experimentales. Más

O

Oxidación

Modificación química por especies reactivas de oxígeno, que afecta con mayor frecuencia a la metionina, la cisteína y el triptófano. La oxidación de la metionina añade 16 Da por cada oxígeno. Más

P

PCAC

Comité Asesor de Preparación Magistral en Farmacia (Pharmacy Compounding Advisory Committee), que asesora a la FDA en asuntos de preparación magistral como las listas de sustancias a granel. Sus votaciones son consultivas, y la FDA actúa mediante su propio proceso normativo.

PEGilación

Unión covalente de cadenas de polietilenglicol a un péptido o una proteína. Aumenta el tamaño hidrodinámico y puede alterar la solubilidad, la eliminación y la inmunogenicidad.

Prueba de esterilidad

Prueba que determina si hay microorganismos viables en un material, normalmente incubando muestras en medios de cultivo. La esterilidad no implica ausencia de endotoxina. Más

Puente disulfuro

Enlace covalente azufre–azufre entre los grupos tiol de dos residuos de cisteína. Puede unir partes de una misma cadena formando un anillo, como en la oxitocina, o unir cadenas separadas. Más

Punto isoeléctrico (pI)

pH en el que un péptido no tiene carga eléctrica neta. La solubilidad suele ser mínima cerca del punto isoeléctrico. Más

Péptido retro-inverso

Péptido formado por D-aminoácidos ensamblados en el orden inverso al de un L-péptido original, de modo que la orientación de las cadenas laterales es en general similar mientras que el esqueleto es resistente a las proteasas. FOXO4-DRI se describe como un péptido D-retro-inverso. Más

R

Receptor

Proteína, a menudo situada en la superficie celular, que se une a una molécula señalizadora específica y transmite una señal al interior de la célula. Muchas hormonas peptídicas actúan a través de receptores acoplados a proteína G.

Residuo

Unidad de aminoácido tal como existe dentro de una cadena peptídica, tras perder los elementos del agua al formar enlaces peptídicos. La longitud de un péptido se cuenta en residuos. Más

RP-HPLC

HPLC de fase inversa, en la que una fase estacionaria hidrofóbica, como C18, y un gradiente creciente de disolvente orgánico separan los péptidos según su hidrofobicidad. Más

RUO (solo para uso en investigación)

Categoría de etiquetado para materiales destinados exclusivamente a la investigación de laboratorio y no al uso en humanos, al diagnóstico ni a la terapia. No indica ninguna aprobación regulatoria.

S

Secuencia con deleción

Impureza de síntesis a la que le faltan uno o más residuos porque un paso de acoplamiento fue incompleto. Difiere del producto objetivo en la masa del residuo faltante. Más

SPPS

Síntesis de péptidos en fase sólida, en la que un péptido se ensambla residuo a residuo sobre un soporte de resina insoluble, eliminando los reactivos mediante lavados entre pasos. Más

Sustancia farmacéutica a granel

En la regulación de la preparación magistral en EE. UU., un principio activo farmacéutico utilizado para elaborar un medicamento. Que una sustancia pueda usarse depende de su estado conforme a las disposiciones 503A o 503B correspondientes.

T

TFA (ácido trifluoroacético)

Ácido fuerte que se usa para escindir los péptidos de la resina en la síntesis Fmoc y como agente de par iónico en HPLC. El trifluoroacetato residual es el contraión predeterminado de muchos péptidos sintéticos. Más

U

UE (unidad de endotoxina)

Unidad de actividad biológica de la endotoxina definida frente a una endotoxina estándar de referencia. Los resultados para sólidos se expresan en UE/mg y para soluciones en UE/mL. Más

V

Vida media

Tiempo que tarda la concentración o la cantidad de una sustancia en reducirse a la mitad, ya sea en una solución, en un estudio de estabilidad o en un sistema biológico. Los valores dependen en gran medida del contexto en que se miden.